第1042章 怪病?真相大白!
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第1042章 怪病?真相大白!

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免疫荧光染色!

这个实验步骤的结果,将掲示最终的答案。

若是结合,那彭月娇的怪病,或许有了新的转机。

但如果没有发生结合……恐怕所有人都会再次茫然,研究也将陷入新的怪圈之中!

此刻,即便是莫雷蒂,心情都有些紧张了。

而许秋则依旧平静。

并且,荧光染色的步骤,也经过了他的改良。

相比于常规的“单张玻片仅包被一种抗原”做法,许秋采取的方案,是用聚赖氨酸包被玻片用疏水笔划分三区,三区分别包被活菌、热灭活菌以及1%TritonX-100裂解菌。

这种做法的优势很大。

一来,可以消除玻片表面性质差异导致的结合偏差。

二则是能够同时展示抗原构象变化对结合的影响。

从活菌,到热灭活菌,再到利用去污剂TritonX-100裂解细胞组织获得蛋白的裂解菌液……

说得直白一点,活菌就是全活,热灭活菌就是活一半,而裂解菌则是全死……后者的作用,是用于确定结合只发生在热灭活菌暴露的抗原表位之上。

而且在进行荧光标记时,许秋也微调了所用材料。

此前,他们用的是FITC标记。

它激发488nm,很容易与组织自发荧光混淆。

毕竟生物样本中最常见的自发荧光就是绿色,与FITC标记高度重合,很容易认错。

而许秋,则换成了AlexaFluor594标记。

这种标记,激发在590nm,而且颜色为红色!

几乎不会与自发荧光混淆!

“太细节了……”

“连荧光的激发与自发荧光混淆都考虑到了?”

“我之前一直用的FITC标记,有几次碰到的荧光反应很强烈,还以为是出成果了,后来才发现是样本中的脂褐素自己在发光……给我白高兴一场!”

“换用AlexaFluor594,则能完全避免这个问题!”

莫雷蒂等人惊叹不已。

而邱伟、张骁等科研人员,则是更加振奋。

这便是他们不愿意错过许秋的实操研究的原因了。

许秋的手术堪称完美。

而他做研究,也讲究精雕细琢。

很多细节上的处理,都极为巧妙。

作为科研人员的他们,看得爽是一回事,另外的关键在于——他们也能借此得到感悟,将同样的手法用在往后的科研之中!

这才是最大的裨益!

……

而在众人目不转睛的注视之中,实验终于到了最后阶段。

荧光染色完成。

接着,是用ImageJ量化荧光强度,通过对比ROI内平均像素值,比较三个区域的结合差异。

所有人都紧张起来。

就连莫雷蒂,都有种手心冒汗的感觉!

这个结果,将决定今晚的努力是否白费了。

许秋的动作却很快。

他直接就开始对比三个区域。

当看到结果时,所有人的眼睛都瞪大了。

活菌区,依旧呈现出微弱非特异性荧光,且平均强度小于15AU。

而1%TritonX-100裂解菌区域,则完全无荧光,意味着无结合。

而中心区域,热灭活菌区,强烈的荧光信号仿佛是一轮诞生于载玻片上的太阳,极其醒目,且平均强度甚至达到了182AU!

足可见结合之激烈!

这一刻,所有人都振奋起来。

“果然……发生了特异性结合!”

“这可比当时埃米尔教授的偶然结合要强烈多了!”

“物化协同,采取β-巯基乙醇还原菌体表面蛋白,释放了被遮蔽的抗原决定簇……这让结合更加顺利地发生!完全是点睛之笔!”

“……”

莫雷蒂等人无比激动。

这一幕,简直是叹为观止!

段善继脸色都激动得涨红,到:“这或许能证明,活菌没法引起怪病,恰恰是死去的嗜沫凝聚杆菌……

“这样就完全能解释通了。不管是埃米尔教授之前碰到的病人,还是彭月娇……他们的发病,都是在嗜沫凝聚杆菌控制了之后!

“此时引发他们怪病的,是已经死去、但仍旧残留在机体内的嗜沫凝聚杆菌!”

当然,直到如今,这仍然只是一个猜想。

毕竟这还只是实验室的结果。

想要验证,唯有做动物模型进行最后的确认。

许秋自然也是知道这一点。

好在,大夏神外研究所这边,最不缺的就是实验动物了。

很快,SD大鼠就被送了过来。

依旧是许秋操刀。

对照组,是健康人的纯化IgG。

而实验组,则是患者彭月娇的纯化IgG。

经过此前的实验,他们已经可以确定一点,彭月娇的怪病,主要的效应抗体基本上IgG了。

毕竟它本身就是慢性免疫反应的主要效应抗体,且可透过血脑屏障攻击神经组织。

具备引发怪病的先天条件。

相比之下,IGM分子量大,不容易透出血管,更别提是通过血脑屏障了。

而如今要做的动物实验,就是用健康人的IgG与彭月娇的IgG,依次与热灭活菌液后的产物进行反应。

若是实验组SD大鼠身上出现类似的表现,则基本上可以证明彭月娇的怪病源于此了。

很快,一批批SD大鼠完成了尾静脉注射。

此后就是漫长的等待了。

这个过程,放在人类,或者是其他大型实验动物身上,可能需要数天,乃至于数周才有可能看到症状。

然而在实验室的大鼠之上,却能迅速捕捉到指标的变化!

最为直接的变化是,实验组,也即模拟彭月娇身体情况的SD大鼠,此时的静息心率开始迅速提升!

并且最为显著的是,实验组大鼠走路开始变得不协调……

这或许代表着,它们的肌群肌力已经出现了变化。

此时,所有人都振奋起来。

彭月娇怪病的表现,就有静息心率提升、右前臂背侧肌群肌力突然大幅度下降!

“还有,检测大鼠的免疫抑制状态、以及排查机体针对移植神经的特异性攻击……”

这些都是彭月娇怪病的典型表现!

此刻众人表情都颇为亢奋。

眼前的实验动物,几乎在完美复现出彭月娇当时的表现,这让他们都有些疯狂了。

折腾了这么久,他们始终没有任何线索。

而如今,犹如黎明破晓,他们总算是看到了希望!

破开彭月娇怪病的希望!

此刻,最兴奋的莫过于埃米尔了。

他等待多年,一直在等第二个病人出现,想要借此找到这一疾病的致病真相。

然而等真碰到了彭月娇,他才发现是自己想得太简单了!

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